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1、微生物檢測中，無菌操作的核心目的是什么？
A. 加快實驗速度
B. 防止雜菌污染樣品
C. 節(jié)省實驗材料
D. 提高培養(yǎng)溫度
2、下列哪種培養(yǎng)基常用于分離腸道致病菌？
A. 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
B. 麥康凱培養(yǎng)基
C. 沙氏培養(yǎng)基
D. 血瓊脂培養(yǎng)基
3、高壓蒸汽滅菌的標準條件是：
A. 100℃, 15分鐘
B. 121℃, 15分鐘
C. 160℃, 2小時
D. 180℃, 30分鐘
4、革蘭氏染色中，關(guān)鍵區(qū)分步驟是：
A. 初染（結(jié)晶紫）
B. 媒染（碘液）
C. 脫色（乙醇）
D. 復染（番紅）
5、檢測水中總大腸菌群時，最常用方法是：
A. PCR擴增
B. 多管發(fā)酵法
C. 酶聯(lián)免疫吸附試驗
D. 基因測序
二、多選題（每題6分，共18分）
6、微生物限度檢查的項目包括（多選）：
A. 需氧菌總數(shù)
B. 霉菌和酵母菌總數(shù)
C. 控制菌（如大腸埃希菌）
D. 病毒載量
7、下列儀器中，用于微生物快速檢測的有（多選）：
A. 實時熒光定量PCR儀
B. 全自動微生物鑒定系統(tǒng)
C. 普通光學顯微鏡
D. ELISA檢測儀
8、關(guān)于細菌內(nèi)毒素檢測，描述正確的有（多選）：
A. 使用鱟試劑（LAL）檢測
B. 主要針對革蘭氏陰性菌
C. 實驗需在無菌環(huán)境中操作
D. 結(jié)果單位為EU（內(nèi)毒素單位）
三、判斷題（每題3分，共15分）
9、紫外線滅菌適用于不耐熱塑料培養(yǎng)皿的表面消毒。 （ ）
10、傾注平板法既能用于菌落計數(shù)，也能用于分離純化微生物。 （ ）
11、微生物檢測中，所有樣品均需在4℃冷藏保存以防止腐敗。 （ ）
12、革蘭氏陽性菌因細胞壁肽聚糖層厚，被染成紅色。 （ ）
13、PCR技術(shù)可直接檢測微生物的活性狀態(tài)。 （ ）
四、簡答題（每題10分，共20分）
14、簡述無菌操作臺（超凈工作臺）的使用規(guī)范（至少3點）。
15、為何微生物檢測結(jié)果需報告為“CFU/g（或CFU/mL）”？解釋"CFU"的定義及意義。
五、綜合題（27分）
16、某食品工廠需檢測一批罐頭樣品的商業(yè)無菌：
(1) 列出3項關(guān)鍵檢測步驟（9分）；
(2) 若發(fā)現(xiàn)罐頭脹罐且pH升高，可能是什么微生物污染？說明依據(jù)（9分）；
(3) 如何通過鏡檢初步判斷污染菌類型？（9分）
答案解析
-
B
解析：無菌操作的核心是避免環(huán)境微生物污染樣品或培養(yǎng)基，確保結(jié)果準確性。 -
B
解析：麥康凱培養(yǎng)基含膽鹽和乳糖，可抑制革蘭氏陽性菌，促進腸道菌生長（如大腸桿菌呈紅色菌落）。 -
B
解析：121℃、103.4 kPa高壓蒸汽維持15分鐘可殺滅所有微生物（包括芽孢），是滅菌金標準。 -
C
解析：脫色是區(qū)分革蘭氏陽性菌（保留結(jié)晶紫）和陰性菌（脫去紫色）的關(guān)鍵步驟。 -
B
解析：多管發(fā)酵法是經(jīng)典方法，通過產(chǎn)氣與產(chǎn)酸現(xiàn)象判斷是否含大腸菌群，操作成本低且可靠。 -
A, B, C
解析：微生物限度檢查針對非無菌產(chǎn)品，包括需氧菌、霉菌/酵母菌總數(shù)及控制菌（如金葡菌、沙門氏菌），病毒檢測不屬常規(guī)項目。 -
A, B, D
解析：實時PCR（快速核酸擴增）、微生物鑒定系統(tǒng)（生化反應(yīng)分析）和ELISA（抗原抗體檢測）均可縮短檢測時間。普通顯微鏡主要用于形態(tài)觀察。 -
A, B, C, D
解析：內(nèi)毒素為革蘭氏陰性菌細胞壁成分，用鱟試劑檢測（靈敏度高），操作需無菌避免干擾，結(jié)果以EU定量。 -
✓
解析：紫外線通過破壞DNA殺菌，適用于光滑物體表面，但對陰影處無效。 -
✓
解析：傾注法將樣品與熔融瓊脂混合，冷卻后菌落分布在培養(yǎng)基內(nèi)部及表面，兼具計數(shù)和分離功能。 -
✗
解析：部分樣品（如冷凍食品）需-20℃保存，冷藏可能導致嗜冷菌生長干擾結(jié)果。 -
✗
解析：革蘭氏陽性菌染成紫色（保留結(jié)晶紫），陰性菌被乙醇脫色后復染成紅色。 -
✗
解析：PCR檢測微生物核酸（DNA/RNA），無法區(qū)分死菌與活菌，需結(jié)合培養(yǎng)法判斷活性。 -
答案要點：
評分：答對3點即滿分。
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開啟紫外燈滅菌30分鐘；
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操作前用75%乙醇擦拭臺面及手部；
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物品擺放需避免氣流阻擋；
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操作中減少手臂頻繁進出（防止空氣擾動）。
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答案要點：
CFU（Colony-Forming Unit）：菌落形成單位，表示樣品中可增殖的活微生物數(shù)量。
意義：因微生物可能成團或鏈狀存在，1個菌落未必對應(yīng)1個菌體，故用CFU更科學反映實際存活單元數(shù)量。 -
答案要點：
(1) 關(guān)鍵步驟：保溫試驗（37℃或55℃培養(yǎng)觀察脹罐）；
開罐后pH測定與感官檢查；
涂片鏡檢及需氧/厭氧培養(yǎng)驗證。
(2) 污染菌推測：
梭菌屬（如產(chǎn)氣莢膜梭菌），依據(jù)：脹罐（產(chǎn)氣）、pH升高（分解蛋白質(zhì)產(chǎn)胺類堿性物質(zhì)）。
(3) 鏡檢判斷：
-
革蘭氏染色：陽性桿菌（梭菌）或陰性桿菌（其他腐敗菌）；
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觀察芽孢（梭菌芽孢常位于菌體中央/末端）。
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