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流式細(xì)胞儀基本介紹

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2025-06-13  來源:網(wǎng)絡(luò)
核心提示:流式細(xì)胞儀是一種利用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)懸浮在流體中的單細(xì)胞或微粒進(jìn)行高通量、多參數(shù)定量分析和分選的精密儀器。其核心原理是:將細(xì)
流式細(xì)胞儀是一種利用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)懸浮在流體中的單細(xì)胞或微粒進(jìn)行高通量、多參數(shù)定量分析和分選的精密儀器。其核心原理是:將細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液后,在鞘液的包裹下形成單細(xì)胞液流,依次通過激光檢測(cè)區(qū)域,細(xì)胞或微粒受激光激發(fā)后產(chǎn)生散射光和熒光信號(hào),這些信號(hào)被光電檢測(cè)器捕獲并轉(zhuǎn)化為電信號(hào),再通過計(jì)算機(jī)軟件分析,實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的物理特性(如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu))和生物學(xué)特性(如抗原表達(dá)、核酸含量、細(xì)胞活性等)的定量檢測(cè)。

流式細(xì)胞儀的顯著優(yōu)點(diǎn)

1. 高通量快速分析

檢測(cè)速度高:可在每秒檢測(cè)數(shù)千至數(shù)萬個(gè)細(xì)胞,短時(shí)間內(nèi)完成大量樣本分析(如臨床血常規(guī)檢測(cè)中,流式細(xì)胞術(shù)可快速分析白細(xì)胞亞群比例)。

適合大規(guī)模篩選:例如在藥物篩選中,可快速檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞凋亡、周期的影響,提高實(shí)驗(yàn)效率。

2. 多參數(shù)同步檢測(cè)

同時(shí)分析多種指標(biāo):通過配置不同波長(zhǎng)的激光(如 488nm、633nm、561nm 等)和熒光檢測(cè)器,可同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的散射光信號(hào)(反映細(xì)胞大小、顆粒度)和多種熒光標(biāo)記物(如細(xì)胞表面抗原、核酸染料、功能探針等),單個(gè)細(xì)胞可獲取 10-30 個(gè)參數(shù)

應(yīng)用場(chǎng)景廣泛:例如在免疫分型中,可同時(shí)標(biāo)記 CD3、CD4、CD8 等多種抗體,精確區(qū)分 T 細(xì)胞亞群;在細(xì)胞周期分析中,結(jié)合 DNA 染料(如 PI)和增殖標(biāo)志物(如 Ki-67),同步分析細(xì)胞增殖狀態(tài)。

3. 單細(xì)胞水平的精確量化
單細(xì)胞分辨率:對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行獨(dú)立檢測(cè),避免群體細(xì)胞的平均化誤差,可捕捉細(xì)胞異質(zhì)性(如腫瘤組織中不同亞型的癌細(xì)胞)。

定量數(shù)據(jù)準(zhǔn)確:通過熒光微球校準(zhǔn),可將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)化為絕對(duì)定量值(如熒光分子數(shù)),數(shù)據(jù)重復(fù)性高(CV 值通常<5%)。

4. 細(xì)胞分選功能(分選型流式)

高純度分選:可根據(jù)設(shè)定的參數(shù)(如熒光強(qiáng)度、散射光特性)對(duì)目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行物理分選,純度可達(dá) 99% 以上,適用于稀有細(xì)胞獲。ㄈ缪h(huán)腫瘤細(xì)胞、造血干細(xì)胞)。

活細(xì)胞保留:分選過程中通過優(yōu)化液流和壓力,可保持細(xì)胞活性,分選后的細(xì)胞可用于培養(yǎng)、測(cè)序或功能研究。

5. 靈活性與兼容性強(qiáng)

樣本類型多樣:可檢測(cè)血液、骨髓、組織消化液、培養(yǎng)細(xì)胞、微生物等多種樣本,甚至可分析微米級(jí)的人工微球或納米顆粒。

技術(shù)拓展性廣:可與其他技術(shù)聯(lián)用(如單細(xì)胞測(cè)序、質(zhì)譜流式),或結(jié)合功能探針(如鈣離子熒光探針、活性氧探針)研究細(xì)胞動(dòng)態(tài)功能。

6. 自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化程度高

操作流程規(guī)范:儀器自帶校準(zhǔn)程序(如微球校準(zhǔn)激光和檢測(cè)器),減少人為誤差;數(shù)據(jù)分析軟件(如 FlowJo、FCS Express)可標(biāo)準(zhǔn)化處理數(shù)據(jù),支持批量分析和結(jié)果可視化(如流式圖、熱圖、火山圖等)。

質(zhì)量控制完善:通過定期校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證(如 CV 值檢測(cè)),確保數(shù)據(jù)的可靠性,符合臨床或科研的標(biāo)準(zhǔn)化要求。

7. 微創(chuàng)或非破壞性檢測(cè)(部分場(chǎng)景)

在臨床檢測(cè)中,僅需少量樣本(如幾微升血液)即可完成多項(xiàng)指標(biāo)分析,適合新生兒、重癥患者等特殊人群;對(duì)于細(xì)胞分選,可在不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的前提下獲取目標(biāo)細(xì)胞,保留其生物學(xué)功能。 
編輯:songjiajie2010

 
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