需要明確的是我們做的是哪種PCR實驗。根據(jù)檢測方法的不同,PCR實驗分為普通PCR法和熒光定量PCR法,前者一般是終點PCR跑膠法測定,所以在選擇耗材時需要關注的主要是耗材本身的導熱性和密封性;而后者是實時檢測熒光信號,除了導熱性和密封性外,對透光性和避光性也有所要求。
密封性、導熱性、透光性、避光性等因素是需要重點關注的:
一、密封性
密封性越好,產(chǎn)物的揮發(fā)越少,得到的產(chǎn)物就越多同時氣溶膠的產(chǎn)生也越少,對于下一輪實驗的污染也就越少,也就意味著假陽性的產(chǎn)生率越低。
二、導熱性
導熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準確度也越高。
三、透光性
這主要是對于熒光定量而言,耗材本身的透光性直接關系到檢測到的熒光信號多少,如果選擇耗材透光性不足,本該檢測到的信號檢測不到,那就會造成對結(jié)果的誤判。
四、避光性
這也是針對熒光定量而言的,同上面的因素,如果在整個實驗過程中沒注意避光,帶有熒光的試劑過度被消耗,那就會影響實驗的擴增效率,導致不準確的結(jié)果產(chǎn)生。
注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
密封性、導熱性、透光性、避光性等因素是需要重點關注的:
一、密封性
密封性越好,產(chǎn)物的揮發(fā)越少,得到的產(chǎn)物就越多同時氣溶膠的產(chǎn)生也越少,對于下一輪實驗的污染也就越少,也就意味著假陽性的產(chǎn)生率越低。
二、導熱性
導熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準確度也越高。
三、透光性
這主要是對于熒光定量而言,耗材本身的透光性直接關系到檢測到的熒光信號多少,如果選擇耗材透光性不足,本該檢測到的信號檢測不到,那就會造成對結(jié)果的誤判。
四、避光性
這也是針對熒光定量而言的,同上面的因素,如果在整個實驗過程中沒注意避光,帶有熒光的試劑過度被消耗,那就會影響實驗的擴增效率,導致不準確的結(jié)果產(chǎn)生。
注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
手機版








